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人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色技術

更新時間:2017-05-16      瀏覽次數(shù):1671

人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒簡介

β2-微球蛋白(β2-microglobulin,BMG)分子量為11800,存在于所有有核細胞的表面,特別是淋巴細胞和腫瘤細胞,并由此釋放入血循環(huán)。它是細胞表面人類淋巴細胞抗原(HLA)的β鏈(輕鏈)部分(為一條單鏈多肽),分子內含一對二硫鍵,不含糖。半壽期約107分鐘,可透過腎小球,但尿僅有濾過量的1%,幾乎*可由腎小管回收。β2-微球蛋白在腎功能衰竭、炎癥及腫瘤時,血漿中濃度可升高。主要的研究應用在于監(jiān)測腎小管功能。特別用于腎移植后,如有排斥反應影響腎小管功能時,可出現(xiàn)尿中BMG排出量增加。在急性白血病和淋巴瘤有神經(jīng)系統(tǒng)浸潤時,腦脊液中BMG可增高。因含量微,常用放射免疫方法測定,正常血漿BMG參考值為1.0-2.6μg/L,尿中0.03-0.37mg/d。

人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色比色技術

顯色

  顯色是ELISA試驗中zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。適當提高溫度,有助于加速顯色。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。在定量檢測中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。ELISA顯色結果通過酶標儀進行,可減少實驗誤差,提高臨界值樣本的分析準確度。盡量避免肉眼直接判斷結果,因為不同個體的視覺存在差異。應注意,加顯色劑時,要保持顯色劑不外流。加終止液時應避免產(chǎn)生較多氣泡,否則可能使假陽性結果的出現(xiàn)概率增加。

比色

  比色的方法有目視法和酶標比色法2種。目視法簡單明了,但對同一標本,操作者的不同有時會出現(xiàn)不同的結果,具有一定的主觀性。比色的結果通常用光密度表達,現(xiàn)按規(guī)定用吸光度表達。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預熱儀器15~30min,使測得結果更為準確。比色前,應先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。在實際應用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對每個環(huán)節(jié)進行嚴格仔細的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應的出現(xiàn),保證檢測結果真實可靠,為研究診斷和疾病防治提供可靠的理論依據(jù)。

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