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性激素放免檢測試劑盒使用說明

更新時間:2018-11-10      瀏覽次數(shù):1635
   性激素放免檢測試劑盒使用說明
  1.樣品測定的準備:(注意:樣品裂解需在4℃或冰上操作)
  對于貼壁細胞:
  吸除培養(yǎng)液,按照6孔板每孔加入200微升裂解液的比例(即相當于細胞培養(yǎng)液量2毫升的1/10)加入裂解液,裂解細胞。裂解細胞時為了裂解充分,可以使用移液器進行反復吹打或晃動培養(yǎng)板使裂解液充分接觸并裂解細胞。通常細胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘,取上清,用于后續(xù)的測定。
  對于懸浮細胞:
  用離心管離心沉淀細胞,棄上清,輕輕彈散細胞,按照6孔板每孔的細胞量加入200微升裂解液的比例加入裂解液,裂解細胞。裂解細胞時為了裂解充分可以彈擊離心管管底或適當Vortex使裂解液充分接觸并裂解細胞。通常細胞在接觸裂解液后會立即裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘,取上清,用于后續(xù)的測定。
  對于組織樣品:
  按照每20毫克組織加入約100-200微升裂解液的比例加入裂解液,然后用玻璃勻漿器或其它勻漿器進行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解。裂解后4℃12000g離心5-10分鐘,取上清,用于后續(xù)的測定。
  2.標準曲線測定的準備:
  冰浴上溶解待用試劑,把ATP標準溶液用ATP檢測裂解液稀釋成適當?shù)臐舛忍荻?。具體的濃度需根據(jù)樣品中ATP的濃度而定。初次檢測可以檢測0.1、1和10微摩爾/升這幾個濃度,在后續(xù)的實驗中更據(jù)樣品中ATP的濃度對標準品的濃度進行適當調(diào)節(jié)。
  3.ATP檢測工作液的配制:
  按照每個樣品或標準品需100微升ATP檢測工作液的比例配制適當量的ATP檢測工作液。把待用試劑在冰浴上溶解。取適當量的ATP檢測試劑,按照1:100的比例用ATP檢測試劑稀釋液稀釋ATP檢測試劑。例如50微升ATP檢測試劑可以加入5毫升ATP檢測試劑稀釋液配制成5毫升ATP檢測工作液。稀釋后的ATP檢測試劑即為用于后續(xù)實驗的ATP檢測工作液。ATP檢測工作液可在冰浴上暫時保存。
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